Ceinfenite espectrometría de masas de enlace directo imagen de columna completa igual enfoque eléctrico icief

Ceinfenite espectrometría de masas de enlace directo imagen de columna completa igual enfoque eléctrico icief

Ceinfente espectrometría de masas de columna completa de enlace directo imagen de enfoque eléctrico isief

CEInfinite iCIEF-MS Plataforma de coupling en línea

En el desarrollo y producción de productos biológicos proteicos, debido a la modificación posttraduccional(ptms) y degradación, que producen una carga eléctrica de la proteína objetivoHeterogeneidadEl cuerpo. BiofarmacéuticoempresaConfiando en el enfoque electroquímico capilar(cief) e imagen cief (icief) para cuantificar los isómeros de carga eléctrica. La caracterización de los isómeros de carga biológica es útil para muchas etapas del ciclo de vida, incluyendo la selección de líneas celulares, estudios de estabilidad, fórmulas yprocesoControl, pero esta caracterización requiere separar la proteína en una sola carga eléctrica con suficiente purezaDestilados de isómerosPara análisis aguas abajo.

Además, el acoplamiento directo del icief con el espectrómetro de masas (ms) utilizado para la caracterización simplificará significativamente el proceso de caracterización.

AES ha desarrollado un sistema icief preparado por ceinfenite y una columna de separación exclusiva de detección de imágenes de columna completa (wcid) para la separación de icief - wcid y el acoplamiento en línea con ms, permitiendo observar en tiempo real la dinámica del enfoque de separación (icief) y el proceso de migración posterior de picos de isómeros de carga separados. Durante la migración a presión, el campo eléctrico mantiene enfocadas las muestras en el capilar de separación. El diámetro interior del capilar de separación es mayor, mientras que el diámetro interior del capilar de transmisión es menor. Por lo tanto, esta diferencia en el diámetro interior reduce enormemente la difusión y remezcla de los isómeros proteicos separados al salir de la columna pequeña.

Detalles

Aspectos destacados del ceinfenite icief - MS

• El icief - ms se combina directamente con el tradicional esi de bajo flujo o nanoflujo de alta sensibilidad de Thermo Fisher science, Waters y bruker.

• Cualquier amortiguador o solución se puede utilizar como líquido complementario. No implica migración química. Las variantes de carga eléctrica de proteínas se introducen en el ms a su vez de acuerdo con el pi.
  

• CE - ms se puede convertir directamente de cualquier método icief o cief existente. Se puede obtener un buen grado de separación a bajas y altas concentraciones de muestras.

Análisis icief - ms de muestras de NIST MAB

El iscief - UV (rojo) y el iscief - Ms (azul) permiten observar claramente el perfil del isómero de carga y obtener excelentes espectros ms de todos los picos de variantes, lo que nos permite deconvolur la mayoría de las variantes completas de carga NIST mab.

Los resultados muestran que los picos alcalinos B1 y B2 son causados principalmente por la isomerización de la lisina C - terminal, y la diferencia entre el peso molecular del pico ácido A1 y el pico principal es pequeña, que puede deberse a modificaciones como la deamida, que requieren más investigación y confirmación a través de la preparación del icief.

Comentarios de los clientes:

",El icief desempeña un papel vital en el monitoreo de los cambios de carga eléctrica durante el desarrollo biofarmacéutico. Ceinfenite nos permite obtener lecturas de masa de variantes de productos detectadas por el icief, lo que ayuda mucho a entender las propiedades químicas de las variantes de carga. Al combinar ceinfenite con la espectrometría de masas precisa de alta resolución proporcionada por el sistema orbitrap ms, se puede obtener un conocimiento detallado de las variantes del producto y la estabilidad del producto.

En resumen, el icief - MS con ceinfenite es una herramienta de caracterización muy poderosa en el desarrollo biofarmacéutico. "

- Dr. dan Bach Kristensen

Científico Jefe de symphogen